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DPPH法和ABTS法清除自由基实验检测的原理与区别

DPPH 自由基清除原理[1-2]
抗氧化剂与DPPH反应,DPPH是一种稳定的自由基,并将其转化为1,1-二苯基-2-(2,4,6-三硝基苯基)肼。褪色程度反映了抗氧化化合物的清除能力。
DPPH 自由基是一种合成的、具有单电子、稳定的、以氮为中心的顺磁化合物。当自由基清除剂存在时,DPPH 自由基接受一个电子或氢原子,形成稳定的 DPPH-H化合物,使其甲醇 或乙醇) 溶液从深紫色变为黄色,变色程度与其接受的电子数量( 自由基清除活性) 成定量关系,因而可用分光光度计进行快速的定量分析。

DPPH 自由基有机溶液呈紫色,在波长为 517nm波长处具有最大光吸收。DPPH-比色法主要利用自由基清除剂提供一个电子与 DPPH 自由基的孤对电子配对,使自身紫色变为黄色,在 517nm 波长处的吸光度变小,其变化程度与自由基清除程度呈线性关系,即自由基清除剂的清除能力越强,吸光度越小。

ABTS自由基清除原理[3]
ABTS可被K2S2O8氧化,生成蓝绿色的自由基阳离子ABTS.+,ABTS.+相当稳定,在414,645,734和805处有最大吸收峰,在抗氧化剂存在下,ABTS.+与之反应,变成没有颜色的ABTS。

DPPH法和ABTS法清除自由基实验检测的区别
1.ABTS法广泛应用于评价抗氧化剂清除自由基的能力,此法快速简单,可用于常规测定,即可测量水溶性化合物,也可测量脂溶性化合物,但其并非生理条件下存在的自由基。
2.与ABTS法相比,DPPH法不需要自由基发生体系,有选择性,只能溶于有机溶剂。

参考文献
[1] Liu J K, Hu L, Dong Z J, et al. DPPH radical scavenging activity of ten natural p-terphenyl derivatives obtained from three edible mushrooms indigenous to China[J]. Chem Biodivers, 2004, 1(4): 601-5.
[2] 熊双丽, 卢飞, 史敏娟, et al. DPPH自由基清除活性评价方法在抗氧化剂筛选中的研究进展[J]. 食品工业科技, 2012, 33(08): 380-383.
[3] 王晓宇. 葡萄酒抗氧化活性及其检测方法的研究[D]. 西北农林科技大学, 2008.


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