又得重复以前的工作。 市场上买回猪脑52个，弃去小脑，细胞破碎；离心，取上层清液，加30%硫酸铵盐析；再离心，取上层清液，加至70%硫酸铵继续盐析；再次离心，取下层沉淀；buffer溶解之，透析（MWCO=12,000~14,0000），上柱...... 过程差不多，不过这次要纯化的目标protein是Gluthione Reductase。 多谢Kevin和Alan的鼎力相助。
| EC 1.8.1.7 |
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散人笔记
—— 学术资源与网络技术博客
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CSH蛋白质纯化课侧记（一） (2006-4-10 22:54:28)
1.Kevin- http://www.tungcheewah.com/blot/
- 還有26個等著你…
這次體積太太太大了，
根本沒法一次過弄好呢。
我們沒有potter-elvehjem homogenizer，
腦漿中很多的細胞都沒法打碎，
似乎浪廢了不少蛋白質，也浪費了不少時間。
缺錢了，我要到政府那邊打工，
兩週後回來。
別忘了把 blender 還給維維，
balance 給isabella，
cold room 的 湯匙給趙小姐，
1m phosphate buffer 的水桶回大lab，
unltafiltration 的 funner 給 vincent，
還有cold room 及 1210 的清潔，
centrifuge room 新機似乎要大力按著才可以關好。
cold room 靠近洗手盤架子上的膠盤是我們的，
而且上面有廢液，要清理，否則會發臭。
問isabella 拿一個大的黑袋子把所有廢渣載好作丟進垃圾箱。
不要忘記以上的幾件事啊。 - 2006-7-15 1:31:35
- 2.散人
- 其实，只用了一半猪脑，能拿到的protein太少了。所以我不太想继续做下去——因为那样做到最后能拿到的pure的protein肯定不够用——那就等于白做了。
- 2006-7-15 17:57:00
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