散人笔记

—— 学术资源与网络技术博客

« 网页配色软件:Color Schemer Studio 在线网站配色器:Online Color Scheme Generator »

HEPES buffer缓冲溶液的配制方法

HEPES分子量为238.31,化学名:4-羟乙基哌嗪乙磺酸,分子式: C8H18N2O4S。
HEPES常用于生物缓冲剂,pH值缓冲范围:6.8-8.2,用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L。
关于HEPES 缓冲溶液的配制,不同的文献资料有不同的说法。根据用途,一种是单纯的HEPES+NaOH,另一种是HEPES+盐。各种配制方法总结如下:

一、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制
119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸馏水中,加0.5~1M 的NaOH水溶液调节至少所需pH(HEPES的有效pH 范围是6.8~8.2),然后用蒸馏水定容至500ml,于4摄氏度保存。

二、加少量盐的HEPES Buffer配方(500ml)
HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH 水溶液调节pH值,最后定容。

三、2×HEPES缓冲盐溶液的配制
将1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g HEPES溶解在90ml的蒸馏水,用0.5M NaOH调节至所需pH值,再用蒸馏水定容至100ml即可。
以下版权声明必须遵守,转载时必须以链接的形式注明如下信息:
原载于 散人笔记
原文地址 http://www.eryi.org/blog/post/hepes-buffer-stock-solution-prepared.html
  • quote 1.fish
  • mg eq.glucose g-1 f.wt. 什么意思?
  • 2007-5-17 9:46:24
  • quote 2.请教
  • 请问如果不慎将HEPeS液放-20 了,还能不能用?
  • 2007-5-17 21:43:44
  • quote 3.散人
  • 1楼:不知道。
    2楼:放-20 度之后可以用。建议放4摄氏度。
  • 2007-5-17 22:39:57
  • quote 4.请教以下HEPES缓冲液的配制方法
  • 请问:
    HEPES缓冲液(HEPES-NaOH50mmol/L,pH7.5,含MgCl210mmol/L,EDTA1mmol/L,DTT 2.5mmol/L,维生素C10mmol/L和不溶性PVP5%)
    上述缓冲液该如何配制,有时间请发到我邮箱中,急需!!!
    非常感谢!
  • 2007-9-26 16:13:54
  • quote 8.心彩翼
  • 请问Tris-HCL 与 EDTA 怎么配置
    是 分开配还是放在一起配置?
    若放在一起 EDTA本身就是酸性 根本不需要HCL呀 pH7.4要靠碱中和

    若分开配,那要怎么用,每次两样各需多少毫升 谢谢
  • 2008-10-3 16:05:52
  • quote 9.博主
  • 溶在一起,之后再调pH
    注意:EDTA用的是二钠盐,而非acid!
  • 2008-10-3 16:29:54

发表评论:

◎欢迎参与讨论,请在这里发表您的看法、交流您的观点。

Copyright 2006-2106. 散人笔记—学术与网络技术博客 All Rights Reserved.

版权声明:转载本站文章必须遵循“署名-非商业用途-保持一致”的创作共用协议.