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HEPES buffer缓冲溶液的配制方法

HEPES分子量为238.31,化学名:4-羟乙基哌嗪乙磺酸,分子式: C8H18N2O4S。
HEPES常用于生物缓冲剂,pH值缓冲范围:6.8-8.2,用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L。
关于HEPES 缓冲溶液的配制,不同的文献资料有不同的说法。根据用途,一种是单纯的HEPES+NaOH,另一种是HEPES+盐。各种配制方法总结如下:

一、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制
119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸馏水中,加0.5~1M 的NaOH水溶液调节至少所需pH(HEPES的有效pH 范围是6.8~8.2),然后用蒸馏水定容至500ml,于4摄氏度保存。

二、加少量盐的HEPES Buffer配方(500ml)
HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH 水溶液调节pH值,最后定容。

三、2×HEPES缓冲盐溶液的配制
将1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g HEPES溶解在90ml的蒸馏水,用0.5M NaOH调节至所需pH值,再用蒸馏水定容至100ml即可。
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原载于 散人笔记
原文地址 http://www.eryi.org/blog/post/hepes-buffer-stock-solution-prepared.html
  1. fish  

    mg eq.glucose g-1 f.wt. 什么意思?

  2. 请教  

    请问如果不慎将HEPeS液放-20 了,还能不能用?

  3. 散人  

    1楼:不知道。
    2楼:放-20 度之后可以用。建议放4摄氏度。

  4. 请教以下HEPES缓冲液的配制方法  

    请问:
    HEPES缓冲液(HEPES-NaOH50mmol/L,pH7.5,含MgCl210mmol/L,EDTA1mmol/L,DTT 2.5mmol/L,维生素C10mmol/L和不溶性PVP5%)
    上述缓冲液该如何配制,有时间请发到我邮箱中,急需!!!
    非常感谢!

  5. 请教以下HEPES缓冲液的配制方法  

    邮箱:hanqihou1983@163.com
    谢谢!

  6. .请教以下HEPES缓冲液的配制方法  

    HEPES缓冲液(HEPES pH7.5,含BSA 1mg/mL,DTT 20mmol/L,SDS 0.1%)
    该如何配制,急需!!!
    邮箱:rose_mm@163.com
    非常感谢!

  7. 请教HEPES缓冲液的配制方法  

    可否用KOH调PH啊?为什么调好ph后溶质析出了呢?请高人指点,谢过!

  8. 心彩翼  

    请问Tris-HCL 与 EDTA 怎么配置
    是 分开配还是放在一起配置?
    若放在一起 EDTA本身就是酸性 根本不需要HCL呀 pH7.4要靠碱中和

    若分开配,那要怎么用,每次两样各需多少毫升 谢谢

  9. 博主  

    溶在一起,之后再调pH
    注意:EDTA用的是二钠盐,而非acid!

  10. 请教HEPES缓冲液的配制方法  

    请问:
    HEPES缓冲液(HEPES-NaOH50mmol/L,pH7.5,含MgCl210mmol/L,2mmol/LEDTA,0.2%(W/V)BSA,2%PVP)
    上述缓冲液该如何配制,有时间请发到我邮箱中,急需!!!
    非常感谢!

  11. hgcgcg  

    不知道为什么我配好的溶液PH是9呢 可以用hcl调不?

  12. hgcgcg  

    我想用它测钙离子 我的配方是 145 mM NaCl, 5 mM KCl, 1 mM Na2HPO4, 1 mM MgCl2, 5 mM
    glucose, 1 mM CaCl2 and 10 mM HEPES, PH计是新调的 我认为没有问题

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